想用甲醇水梯度洗脱，凝胶用甲醇泡过之后用什么上柱啊 ？
用甲醇直接上么？上完之后可以直接用水洗么？
然后再一点点加大甲醇得浓度
了
你说的够乱的。。。

如果你是甲醇，水走梯度，并且是增大水的比例，你完全可以用甲醇装柱，甲醇上柱，然后慢慢增大水的比例。

如果是甲醇的比例增大，应该用水装柱，用水上柱，增大甲醇的浓度。

纯水纯甲醇碰到会产生很多气泡。
哦~
我是想用甲醇-水走梯度,增大甲醇的量.
还有个问题希望指教,没有用过的sephadexLH-20用什么处理一下呢?
溶胀开了就可以用了，不需要处理。如果你巨有钱，就再筛一次颗粒，把小颗粒的凝胶扔掉。
谢了
可是我巨没钱
我导师说用水抽滤三次再用甲醇抽滤三次就OK了
我有个样品纯度不到80%,之前用10%乙腈的ODS走过,因为样品就50mg了所以不想走梯度了,用甲醇-水多少比例的走合适呢?
样品很可能就不见了吧?
不会啊，凝胶几乎不损失样品的。
不用抽滤。
用甲醇溶胀过夜就可以装柱了.不走梯度也行啊。直接用甲醇冲就可以啊。或者甲醇-水，先甲醇，慢慢增大比例，最后用水。
样品什么比例最好溶就用什么比例，让样品溶于尽量少的溶剂中。
那就慢慢来，流速慢点。

正规的溶胀方法应该是用水或者你的溶剂浸泡过夜，或者煮沸3个小时，这样才算溶胀开。
凝胶想滴快点也不现实啊
用50％甲醇跑的，效果还可以。因为我的样品极性很大，怕单用甲醇不行。只是用50％甲醇溶样品的时候有点困难，需要多加点溶液。
但在检测时想用正相板，有什么条件比氯仿：甲醇：水＝65：35：10极性还大的而且分层的条件么？