我用甲醇作为溶剂装Sephadex-lh20柱,我是这样装柱的:将色谱柱装二分之一的甲醇,将凝悬住液缓缓倒入,直至所需的高度,但装了几次,都出现了一圈圈的纹路,这是怎么回事?甲醇的流速也特别的慢,我应该怎么做?
适当加快甲醇流速。倾倒时连续,不间断,可能会有用。
我觉得应该是你凝胶还没溶胀好,所以柱子溶剂流动同时还有个溶胀的过程,所以流的比较慢。你柱子有一圈圈纹路应该更说明溶胀的不均匀。
正确的装柱方法应该是称取一定量的凝胶,然后以至少4倍量的甲醇(甲醇和水都以4倍量溶胀,别的溶剂因溶胀系数而异)浸泡溶胀几小时,可以微热加速溶胀。接着将柱子装上1/4的甲醇,将溶胀好的凝胶缓缓倒进去,速度不能太快,否则很可能带入气泡。最后以最快的速度冲柱子,直到柱子塌实为止。
同意楼上的建议
你可能是浸泡时间不足
还有可能是不连续倒入,柱子粗的话不好装
适当加快甲醇流速。倾倒时连续,不间断,可能会有用。
我觉得应该是你凝胶还没溶胀好,所以柱子溶剂流动同时还有个溶胀的过程,所以流的比较慢。你柱子有一圈圈纹路应该更说明溶胀的不均匀。
正确的装柱方法应该是称取一定量的凝胶,然后以至少4倍量的甲醇(甲醇和水都以4倍量溶胀,别的溶剂因溶胀系数而异)浸泡溶胀几小时,可以微热加速溶胀。接着将柱子装上1/4的甲醇,将溶胀好的凝胶缓缓倒进去,速度不能太快,否则很可能带入气泡。最后以最快的速度冲柱子,直到柱子塌实为止。
同意楼上的建议
你可能是浸泡时间不足
还有可能是不连续倒入,柱子粗的话不好装