现在,很多人都是根据薄层板来确定硅胶柱的洗脱溶剂。但本人对于里面的有好几个经验之谈不知道它为什么这样,所以想在这和各位高手讨论一下
1。为什么rf值要在0.2-0.3之间,很多人说是硅胶柱是下行展开多了溶剂重力的作用,从而为了更好的将两个点分开。但是如果有个点rf值在0.8,而有个点在0.4或者0.3呢,那是不是这个溶剂条件就也可以啊,有的人说一般0.3以上不要有斑点,但不知道为什么,如果rf值相差比较大的话不是也可以分开啊,假设现用氯仿作为初始溶剂,洗下来的馏分一开始就有很多个点,应该说是这些点极性差不多,都是一起下来的,但为什么用来跑薄层,氯仿作为展开剂,其rf值有的是相差0.5左右,这是为什么啊。
2.一般rf值在0.2-0.3之间的,是不是到时硅胶柱洗脱也是和薄层的差不多,比如要将0.2-0.3之间的点洗下来,不就相当于你走一个柱体积的柱子,如果你填的硅胶有1米长,那个点就大概走了0.2-0.3米,也就是大概要5个柱体积才能洗下来。我自己不敢确认是不是这样,因为毕竟薄层和硅胶柱的展开形式不一样。
3.还有就是样品的量的问题。我们用薄层板来摸条件的时候,其点样量都是很少,而到时上柱就不一样了,是不是会存在点间的大量交叉。还有就是在薄层板上有些点可能才刚刚从原点露出来一点,而硅胶柱上就可能已经快下到柱底了。还有就是在薄层板上原点几乎不动,就只有个别点在原点上面,但上硅胶柱时,用跑薄层的洗脱剂洗的时候,其样品层会有东西慢慢往下走了,就是慢慢的样品层就看不到了,变成一大块了,为什么会这样呢,薄层板摸出来的条件会差很大吗,这个对于后面的过柱会不会有一定的影响啊。
4.还有就是溶剂的回收问题,对于氯仿-甲醇-水三相系统的,你们是怎么回收利用的啊,我是这样做的,不知道行不行,大家指教一下,我是将这洗脱剂全部回收回来,到时在将回收回来的溶剂当作一个整体,一种新的溶剂,到时在取该混合溶剂和甲醇配对去跑薄层板,从而选择一种你认为可以的溶剂系统。
5.最后一个问题就是,我做的有个色带,已经到柱底了 ,但是洗下来的东西颜色并不是很深,和柱上的颜色一比,浅多了,而且上面的另一个色带又逐渐的替代了下面这个色带,所以下面那个色带就和上面那个混合在一起了,一般不是极性小的成分先下来的吗,但为什么下面那个色带还没有下来,上面那个色带就取代了下面的那个,有点不理解,希望大家能够帮忙解释一下!还有就是大家能够谈一下薄层板所摸的条件与上硅胶柱的具体的联系。
首先,你是一个做实验很细心的人,值得表扬。
然后,你可以先谈谈自己思考的结果么?
1.rf值多少才算合理这个不同的人有不同的理解,在用薄层板来确定硅胶柱的洗脱溶剂时,变化的因素太多,宽的薄层板和细长的薄层板摸条件时,两者相差很大,还有就是你自己每次装的硅胶拄的松或者实的程度也不一样的,这样你的条件就会不同啦,这样你就要靠自己的经验来确定什么样的薄层板摸的条件与你装的硅胶拄最相似.还有就是一些小极性物质可能是在薄层板上你冲的比较前面不怎么看的出来,在硅胶上用氯仿就直接下来.在硅胶拄上很容易出现的是中间的流速比两边要快的多,所以很多极性差别不大的物质就会一起下来.如果柱子真装的不好的话,就算极性差别梢大也有可能.柱子关的太久啦也会出现这种情况的
2.不管rf值选择多少重要的是要持之以恒,最好就是一口气把要点冲下来,拖拖拉拉的话在好的条件和再分的开的点你也冲不到东西.
3.上样的厚度是越薄越好.其他参考第一条.
4.是个办法,可是实验报告好象就不怎么好写拉.
5.参考第一条
1。为什么rf值要在0.2-0.3之间,很多人说是硅胶柱是下行展开多了溶剂重力的作用,从而为了更好的将两个点分开。但是如果有个点rf值在0.8,而有个点在0.4或者0.3呢,那是不是这个溶剂条件就也可以啊,有的人说一般0.3以上不要有斑点,但不知道为什么,如果rf值相差比较大的话不是也可以分开啊,假设现用氯仿作为初始溶剂,洗下来的馏分一开始就有很多个点,应该说是这些点极性差不多,都是一起下来的,但为什么用来跑薄层,氯仿作为展开剂,其rf值有的是相差0.5左右,这是为什么啊。
2.一般rf值在0.2-0.3之间的,是不是到时硅胶柱洗脱也是和薄层的差不多,比如要将0.2-0.3之间的点洗下来,不就相当于你走一个柱体积的柱子,如果你填的硅胶有1米长,那个点就大概走了0.2-0.3米,也就是大概要5个柱体积才能洗下来。我自己不敢确认是不是这样,因为毕竟薄层和硅胶柱的展开形式不一样。
3.还有就是样品的量的问题。我们用薄层板来摸条件的时候,其点样量都是很少,而到时上柱就不一样了,是不是会存在点间的大量交叉。还有就是在薄层板上有些点可能才刚刚从原点露出来一点,而硅胶柱上就可能已经快下到柱底了。还有就是在薄层板上原点几乎不动,就只有个别点在原点上面,但上硅胶柱时,用跑薄层的洗脱剂洗的时候,其样品层会有东西慢慢往下走了,就是慢慢的样品层就看不到了,变成一大块了,为什么会这样呢,薄层板摸出来的条件会差很大吗,这个对于后面的过柱会不会有一定的影响啊。
4.还有就是溶剂的回收问题,对于氯仿-甲醇-水三相系统的,你们是怎么回收利用的啊,我是这样做的,不知道行不行,大家指教一下,我是将这洗脱剂全部回收回来,到时在将回收回来的溶剂当作一个整体,一种新的溶剂,到时在取该混合溶剂和甲醇配对去跑薄层板,从而选择一种你认为可以的溶剂系统。
5.最后一个问题就是,我做的有个色带,已经到柱底了 ,但是洗下来的东西颜色并不是很深,和柱上的颜色一比,浅多了,而且上面的另一个色带又逐渐的替代了下面这个色带,所以下面那个色带就和上面那个混合在一起了,一般不是极性小的成分先下来的吗,但为什么下面那个色带还没有下来,上面那个色带就取代了下面的那个,有点不理解,希望大家能够帮忙解释一下!还有就是大家能够谈一下薄层板所摸的条件与上硅胶柱的具体的联系。
首先,你是一个做实验很细心的人,值得表扬。
然后,你可以先谈谈自己思考的结果么?
1.rf值多少才算合理这个不同的人有不同的理解,在用薄层板来确定硅胶柱的洗脱溶剂时,变化的因素太多,宽的薄层板和细长的薄层板摸条件时,两者相差很大,还有就是你自己每次装的硅胶拄的松或者实的程度也不一样的,这样你的条件就会不同啦,这样你就要靠自己的经验来确定什么样的薄层板摸的条件与你装的硅胶拄最相似.还有就是一些小极性物质可能是在薄层板上你冲的比较前面不怎么看的出来,在硅胶上用氯仿就直接下来.在硅胶拄上很容易出现的是中间的流速比两边要快的多,所以很多极性差别不大的物质就会一起下来.如果柱子真装的不好的话,就算极性差别梢大也有可能.柱子关的太久啦也会出现这种情况的
2.不管rf值选择多少重要的是要持之以恒,最好就是一口气把要点冲下来,拖拖拉拉的话在好的条件和再分的开的点你也冲不到东西.
3.上样的厚度是越薄越好.其他参考第一条.
4.是个办法,可是实验报告好象就不怎么好写拉.
5.参考第一条