请问；各位同仁，你们在做复方氨基酸注射液时（20种左右），是采用的那个公司的分析方法，那个方法相对成本较低，且实用。
Waters的ACCQ.TAG法
我建议采用戴安的AAA－Direct氨基酸分析系统，无须衍生化，近20种一起分析。
进样体积: 25µL
标准: NIST=2.5µmol/mL in 0.1 M HCl 溶液
稀释标准(用去离子水): 20nmol/mL
色谱柱: AminoPac PA10 分离柱与保护柱(2mm)
柱温: 30℃
系统操作反压: < 3,000 psi
淋洗液:
E1: 去离子水
E2: 250mM NaOH
E3: 1M 醋酸钠
淋洗液流速: 0.25mL/min
ED50操作参数: AAA Au 工作电极;pH参比电极;电位波型见表1.
梯度淋洗: 见表2.
色谱峰1- 精氨酸(Arginine); 2- 赖氨酸(Lysine); 3-丙氨酸(Alanine);4-苏氨酸(Threonine);5- 甘氨酸(Glycine);6-缬氨酸(Valine);7- 丝氨酸(serine); 8- 脯氨酸(Proline); 9- 异亮氨酸(Isoleucine);10- 亮氨酸(Leucine);11- 蛋氨酸(Methionine);12-组氨酸(Histidine);13- 苯基丙氨酸(Phenylalanine);14- 谷氨酸(Glutamate);15- 天冬氨酸(Asparate);16- 胱氨酸(Cystine); 17- 酪氨酸(Tyrosine)
表2. 梯度淋洗程序
时间(分) %E1 %E2 %E3 曲线 Comments
Init 80 20 0 5 装样
0.0 80 20 0 5 进样
2.0 80 20 0 5
8.0 68 32 0 8
11.0 66 34 0 8
18.0 40 20 40 8
21.0 44 16 40 5
23.0 14 16 70 8
42.0 14 16 70 8
42.1 20 80 0 5
44.1 20 80 0 5
44.2 76 24 0 5
60.0 80 20 0 5
75.0 80 20 0 5 结束
表1.波型
时间(秒) 电位(V)vs pH 积分
0.000 +0.13
0.040 +0.13
0.050 +0.33
0.210 +0.33 Begin
0.220 +0.60
0.460 +0.60
0.470 +0.33
0.560 +0.33 End
0.570 -1.67
0.580 -1.67
0.590 +0.93
0.600 +0.13
Waters的ACCQ.TAG法
运行一针,仅要45分钟!
双泵梯度
谢谢,各位给我的指导,但是waters的成本很贵的,且很费色谱柱的,还有没有其他较好的衍生方法,安捷伦的方法,如何,有那位大师用过吗
快求助,我在做冻干样品费休水分测定时,因为样品含的有结晶水,且特容易吸潮,最重要的是它不溶于无水甲醇,所以每次测定水分经常超出限度,但费休样品溶液的色泽看起很深了,(显紫红)请问这样合理吗,有啥办法呢,药典上不是也有样品不溶于无水甲醇,但不还是用费休法测量吗?
PITC,比Waters的ACCQ.TAG法要容易做,且成本低
我公司用的是卫生部九八年颁发的一个标准，混合氨基酸含量（除色氨酸和乙酰半胱）采用氨基酸分析仪测定，色氨酸采用紫外测吸收度法，乙酰半胱采用HPLC
最近刚好在做氨基酸的测定，手头上没有资料，只好凭记忆告诉你。
用的就是 安捷伦的柱前衍生，是用OPA试剂和硼酸溶液柱前衍生，然后进样分析。
流动相是A:以乙酸钠为主的水相
流动相B：乙酸钠和甲醇，乙腈混合，以有机相为主。
梯度洗脱，25分钟走完。
柱子是安捷伦公司特定的做氨基酸分析的柱，2.1mm粒径。
你可以联系 安捷伦公司，他们会有一个 氨基酸分析包的，包括试剂和柱子还有特定的分析软件，（如果不是特殊分析，软件可以不要，试剂也可以制剂配制，）他们也有成熟的方法可以给。
最近刚好在做氨基酸的测定，手头上没有资料，只好凭记忆告诉你。
用的就是 安捷伦的柱前衍生，是用OPA试剂和硼酸溶液柱前衍生，然后进样分析。
流动相是A:以乙酸钠为主的水相
流动相B：乙酸钠和甲醇，乙腈混合，以有机相为主。
梯度洗脱，25分钟走完。
柱子是安捷伦公司特定的做氨基酸分析的柱，2.1mm粒径。
你可以联系 安捷伦公司，他们会有一个 氨基酸分析包的，包括试剂和柱子还有特定的分析软件，（如果不是特殊分析，软件可以不要，试剂也可以制剂配制，）他们也有成熟的方法可以给。
使用的DABS Cl 柱前衍生，普通C18柱，紫外检测器，流动相A：0.1mol/L柠檬酸钠（调pH值6.55±0.05）55ml，DMF20ml，水425ml。
流动相B：流动相A60ml，4％DMF/乙腈140ml。
梯度洗脱，约30分钟走完。 2 1 2 下一页 尾页
Waters的ACCQ.TAG法
我建议采用戴安的AAA－Direct氨基酸分析系统，无须衍生化，近20种一起分析。
进样体积: 25µL
标准: NIST=2.5µmol/mL in 0.1 M HCl 溶液
稀释标准(用去离子水): 20nmol/mL
色谱柱: AminoPac PA10 分离柱与保护柱(2mm)
柱温: 30℃
系统操作反压: < 3,000 psi
淋洗液:
E1: 去离子水
E2: 250mM NaOH
E3: 1M 醋酸钠
淋洗液流速: 0.25mL/min
ED50操作参数: AAA Au 工作电极;pH参比电极;电位波型见表1.
梯度淋洗: 见表2.
色谱峰1- 精氨酸(Arginine); 2- 赖氨酸(Lysine); 3-丙氨酸(Alanine);4-苏氨酸(Threonine);5- 甘氨酸(Glycine);6-缬氨酸(Valine);7- 丝氨酸(serine); 8- 脯氨酸(Proline); 9- 异亮氨酸(Isoleucine);10- 亮氨酸(Leucine);11- 蛋氨酸(Methionine);12-组氨酸(Histidine);13- 苯基丙氨酸(Phenylalanine);14- 谷氨酸(Glutamate);15- 天冬氨酸(Asparate);16- 胱氨酸(Cystine); 17- 酪氨酸(Tyrosine)
表2. 梯度淋洗程序
时间(分) %E1 %E2 %E3 曲线 Comments
Init 80 20 0 5 装样
0.0 80 20 0 5 进样
2.0 80 20 0 5
8.0 68 32 0 8
11.0 66 34 0 8
18.0 40 20 40 8
21.0 44 16 40 5
23.0 14 16 70 8
42.0 14 16 70 8
42.1 20 80 0 5
44.1 20 80 0 5
44.2 76 24 0 5
60.0 80 20 0 5
75.0 80 20 0 5 结束
表1.波型
时间(秒) 电位(V)vs pH 积分
0.000 +0.13
0.040 +0.13
0.050 +0.33
0.210 +0.33 Begin
0.220 +0.60
0.460 +0.60
0.470 +0.33
0.560 +0.33 End
0.570 -1.67
0.580 -1.67
0.590 +0.93
0.600 +0.13
Waters的ACCQ.TAG法
运行一针,仅要45分钟!
双泵梯度
谢谢,各位给我的指导,但是waters的成本很贵的,且很费色谱柱的,还有没有其他较好的衍生方法,安捷伦的方法,如何,有那位大师用过吗
快求助,我在做冻干样品费休水分测定时,因为样品含的有结晶水,且特容易吸潮,最重要的是它不溶于无水甲醇,所以每次测定水分经常超出限度,但费休样品溶液的色泽看起很深了,(显紫红)请问这样合理吗,有啥办法呢,药典上不是也有样品不溶于无水甲醇,但不还是用费休法测量吗?
PITC,比Waters的ACCQ.TAG法要容易做,且成本低
我公司用的是卫生部九八年颁发的一个标准，混合氨基酸含量（除色氨酸和乙酰半胱）采用氨基酸分析仪测定，色氨酸采用紫外测吸收度法，乙酰半胱采用HPLC
最近刚好在做氨基酸的测定，手头上没有资料，只好凭记忆告诉你。
用的就是 安捷伦的柱前衍生，是用OPA试剂和硼酸溶液柱前衍生，然后进样分析。
流动相是A:以乙酸钠为主的水相
流动相B：乙酸钠和甲醇，乙腈混合，以有机相为主。
梯度洗脱，25分钟走完。
柱子是安捷伦公司特定的做氨基酸分析的柱，2.1mm粒径。
你可以联系 安捷伦公司，他们会有一个 氨基酸分析包的，包括试剂和柱子还有特定的分析软件，（如果不是特殊分析，软件可以不要，试剂也可以制剂配制，）他们也有成熟的方法可以给。
最近刚好在做氨基酸的测定，手头上没有资料，只好凭记忆告诉你。
用的就是 安捷伦的柱前衍生，是用OPA试剂和硼酸溶液柱前衍生，然后进样分析。
流动相是A:以乙酸钠为主的水相
流动相B：乙酸钠和甲醇，乙腈混合，以有机相为主。
梯度洗脱，25分钟走完。
柱子是安捷伦公司特定的做氨基酸分析的柱，2.1mm粒径。
你可以联系 安捷伦公司，他们会有一个 氨基酸分析包的，包括试剂和柱子还有特定的分析软件，（如果不是特殊分析，软件可以不要，试剂也可以制剂配制，）他们也有成熟的方法可以给。
使用的DABS Cl 柱前衍生，普通C18柱，紫外检测器，流动相A：0.1mol/L柠檬酸钠（调pH值6.55±0.05）55ml，DMF20ml，水425ml。
流动相B：流动相A60ml，4％DMF/乙腈140ml。
梯度洗脱，约30分钟走完。 2 1 2 下一页 尾页