各位老师，我这几天实验郁闷，苦无良策，请教一个问题
老板（导师）最近买了一台瑞士BUCHI的中压柱系统，填料是C18，我手上有黄酮（苷元）单体纯度是98％左右，但有个明显的杂质，意欲在这上面分开，我用HPLC，岛津C18柱，150mm，甲醇－水＝70：30的条件，目标黄酮在2.5min，杂质在5.0min。但在中压柱上试了丙酮－水=70:30,100mL/MIN,根本分不开（用丙酮主要考虑丙酮的溶解度大一点，这样一次上样量能大点）
我现在已经用了半箱丙酮了，不见效果，不知哪位高人指点一二，告诉我用中压分离黄酮的方法，不胜感激！
你应用丙酮代替液相摸出的甲醇行吗？两者的洗脱能力一致吗？有没有用丙酮－水=70:30走hplc，看分离效果如何？2.5分钟就出峰太快了，你把这个条件直接应用到中压上肯定不行。我这里有些化合物的分离hplc保留时间10min，然后把对应的洗脱溶剂有机相比例降低一半应用到中压，必要时可以类似梯度。
你buchi用的C18柱填料粒径多大？40～60um的？这个分辨率很低，你可以试试20～40um的，这个柱效能高很多，buchi的设备也能耐受的了这么高的压力。

另外，你应该如2楼说的，先用丙酮在HPLC上摸一下，看能否分开，然后再线性放大到MPLC上。