最近要提取中药中的总黄酮，不知道怎么测含量，看了很多说的硝酸铝法，不知道具体操作是怎么样的，还有用芦丁标准品对照，具体的过程是怎样的，哪位大侠能详细的讲讲，不胜感激！



方法
1. 对照品制备
精密称取芦丁对照品20.8 mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。
2.样品溶液制备
精密称取样品0.50g,精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。
3.标准曲线的制备
精密称取对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇置10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml ，摇匀，放置6分钟，加1mol/L氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。


为了更有可信度，你可以用全波长扫描一下你样品溶液，看最大吸收波长。之后通过文献比对，选择一种和改最大吸收波长差不多的黄酮作为标准品，做曲线。这样可信度就高了。

找篇文献，照着做就行了。有标准方法就直接用，没有就自己做套方法学考察


楼主样品中含有芦丁吗?如果没有或含量很低的话,用芦丁作对照品有点有合适


我不知道有没有芦丁啊 那是合适还是不合适呢

我现在也在做总黄酮这块，若你的样品中芦丁含量较低的话，也可以用硝酸铝法的，这是药典中规定的一种测总黄酮的方法，你就找篇文献按照步骤做就行，希望这个答复对你有帮助


我现在用的就是硝酸铝但是和文献写的有点差距但是标线效果还不错

我不知道有没有芦丁啊 那是合适还是不合适呢

芦丁做对照品不一定被测物也是芦丁呀，芦丁是黄铜类代表成分，显色后测定成分为黄铜的络合物，色谱吸收在510nm正负1nm,黄酮类成分与三氯化铝显色后大部分都类同。但你必须用芦丁作对照品呀，没有对照品你怎么计算含量呀。

我不知道有没有芦丁啊 那是合适还是不合适呢

还有，你没有芦丁不但没法计算含量，你也没法比较供试品与对照品的相关性。最少你得做个光谱扫描，供试品和对照品有共同的吸收峰才能在最大吸收处去测定吧。